Питательный агар для культивирования и выделения листерий (среда ПАЛ) набор. Инструкция по применению питательного агара для выделения листерий пал Питательный агар для выделения листерий среда пал

Агар для идентификации листерий (ПАЛКАМ) с добавкой FD061 используют для селективного выделения и идентификации видов Listeria .

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 69,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50 0 С и асептически внести растворенное в воде содержимое 2 флаконов с селективной добавкой (PALCAM) для листерий ( FD061 ). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.

Принцип и оценка результата:

Агар для идентификации листерий (PALCAM агар), также известный как Полимиксин (Polymyxin) – Акрифлавин (Acriflavine) – Литий (Lithium-chloride) – Цефтазидим (Ceftazidime) Эскулин (Esculin) – Маннит (Mannitol) агар, был предложен Van Netten с соавт. (1). Рекомендуется для выделения листерий из пищевых продуктов.

Среда является высоко селективной ввиду наличия в ней хлорида лития, цефтазидима, полимиксина В и акрифлавина. PALCAM агар - дифференциально-диагностическая среда, в которой используются 2 индикаторные системы: с эскулином и маннитом.

Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Листерии не ферментируют маннит, поэтому сбраживающие маннит энтерококки и стафилококки формируют цветные колонии (от красного до желтого). Микроаэрофильные условия ограничивают рост аэробов, подобных представителям родов Bacillus и Pseudomonas .

Введение в состав среды яичного желтка (2,5%) способствует восстановлению поврежденных клеток (2). Добавление среды с кровью поверх PALCAM агара позволяет дифференцировать и подсчитать количество гемолитических листерий (3).

В зависимости от типа анализируемой пробы перед высевом на PALCAM агар должно быть проведено обогащение в том или ином бульоне для селективного обогащения.

Контроль качества: Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-розовый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,3% агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет красную окраску, прозрачна, со слегка опалесцирующей поверхностью.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (6,9 % вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35 °С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Характеристика колоний

П редназначен для выделения возбудителя листериоза из пищевых продуктов при их бактериологическом исследовании, клинического патологического материала человека и животных, санитарных посевов из объектов внешней среды, а также для культиви­рования музейных, производственных штаммов и культур, выделенных на обогатительных средах. Компонентный состав высоко селективен ввиду присутствия в нем добавок хлорида лития, цефтазидима, полимиксина В и акрифлавина.

Дифференцирующая способность среды обусловлена использованием 2 индикаторных систем: с эскулином и маннитом.

Дифференциально-диагностическая среда, на которой Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Листерии не ферментируют маннит, поэтому сбраживающие маннит энтерококки и стафилококки формируют цветные колонии (от красного до желтого). Микроаэрофильные условия ограничивают рост аэробов, подобных представителям родов Bacillus и Pseudomonas.

Введение в состав среды яичного желтка (2,5%) способствует восстановлению поврежденных клеток. Добавление среды с кровью поверх PALCAM агара позволяет дифференцировать и подсчитать количество гемолитических листерий.

В зависимости от типа анализируемой пробы перед высевом на PALCAM агар должно быть проведено обогащение в том или ином бульоне для селективного обогащения

Состав среды: панкреатический гидролизат рыбной муки, панкреатический гидролизат казеина, натрий хлористый, пептон мясной, дрожжевой экстракт, литий хлористый, эскулин, железо лимонноамиачное зеленое или коричневое, натрий углекислый, натрий хлористый, агар, селективная добавка.

В виде гомогенного сухого, легко растворимого порошка светло-желтого цвета, светочувствителен.

Селективная добавка в виде мелкодисперсного порошка светло-розового цвета, светочувствительный.

Готовая среда желто-зеленого цвета, прозрачна, со слегка опалесцирующей поверхностью, по плотности соответствует 1,3% агаровому гелю.

Кислотность среды: при 25°С водный раствор (6,9% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Цена: 10 437.00 RUB

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Производитель: Оболенск

Страна: Россия

Ед. изм.: набор

Упаковка: 250г

Вид упаковки: полиэтиленовая банка

Артикул: О72

Описание

Питательный агар для выделения и культивирования Listeria spp., сухой. Предназначен для выделения возбудителя листериоза из пищевых продуктов при их бактериологическом исследовании, клинического патологического материала человека и животных, санитарных посевов из объектов внешней среды, а также для культиви­рования музейных, производственных штаммов и культур, выделенных на обогатительных средах. Компонентный состав высоко селективен ввиду присутствия в нем добавок хлорида лития, цефтазидима, полимиксина В и акрифлавина (5 флаконов добавки в комплекте со средой). Дифференцирующая способность среды обусловлена использованием 2 индикаторных систем: с эскулином и маннитом

Функциональное назначение

Дифференциально-диагностическая среда, на которой Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Листерии не ферментируют маннит, поэтому сбраживающие маннит энтерококки и стафилококки формируют цветные колонии (от красного до желтого). Микроаэрофильные условия ограничивают рост аэробов, подобных представителям родов Bacillus и Pseudomonas.
Введение в состав среды яичного желтка (2,5%) способствует восстановлению поврежденных клеток. Добавление среды с кровью поверх PALCAM агара позволяет дифференцировать и подсчитать количество гемолитических листерий.
В зависимости от типа анализируемой пробы перед высевом на PALCAM агар должно быть проведено обогащение в том или ином бульоне для селективного обогащения

Технические характеристики

Состав среды: панкреатический гидролизат рыбной муки, панкреатический гидролизат казеина, натрий хлористый, пептон мясной, дрожжевой экстракт, литий хлористый, эскулин, железо лимонноамиачное зеленое или коричневое, натрий углекислый, натрий хлористый, агар, селективная добавка.
В виде гомогенного сухого, легко растворимого порошка светло-желтого цвета, светочувствителен. Селективная добавка в виде мелкодисперсного порошка светло-розового цвета, светочувствительный.
Готовая среда желто-зеленого цвета, прозрачна, со слегка опалесцирующей поверхностью, по плотности соответствует 1,3% агаровому гелю.
Кислотность среды: при 25°С водный раствор (6,9% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Готовая среда пригодна в течение 7 суток при температуре хранения +2...8°С.
Форма выпуска: сухой порошок в полиэтиленовых банках по 250 г, селективная добавка во флаконах по 0,045 г.
Набор реагентов необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре +2...30°C.
Срок годности среды - 2 года с даты производства, указанной на упаковке. Срок годности добавки - не менее срока годности среды.
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/09162

Инструкция по применению питательного агара для выделения листерий ПАЛ.
Инструкция составлена на основе ГОСТ-Р 51921-2002 «Продукты пи­щевые. Методы выявления и определения бактерий Listeria monocyto-genes».

Питательный агар ПАЛ является селективно-диагностической средой и предназначен для выявления колоний бактерий Listeria monocytogenes.

ФОРМА ВЫПУСКА:

Среда выпускается в герметично укупоренных стеклянных флаконах по 200 и 400 мл. Селективная добавка к агару ПАЛ выпускается в уку­поренных пенициллиновых флаконах и рассчитана 1 литр среды.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ СРЕДЫ:

В асептических условиях вскрыть флакон и заменить резиновую пробку флакона на стерильную ватно-марлевую. Расплавить среду на водяной бане (не кипятить!), охладить до 48 – 50 °С, добавить селектив­ную добавку, согласно инструкции по применению добавки, и разлить в стерильные чашки Петри. Среда готова к применению.

ТЕХНИКА ИССЛЕДОВАНИЯ:

Посев на среду ПАЛ производят из пробирок с селективной средой для обогащения (ПБЛ II или бульон Фразера) после инкубации, незави­симо от наличия или отсутствия признаков роста, в том числе почерне­ния. Посев производят бактериологической петлей из культуральной жидкости на поверхность агара. Посевной материал распределяют по поверхности шпателем или наносят петлей в виде штриха. Допускает­ся проводить пересев параллельно на поверхность двух плотных се­лективно-диагностических сред (например, можно использовать до­полнительно ПАЛКАМ-агар или Оксфордский агар).

Посевы инкубируют при температуре 37 ± 1 °С в течение 24 - 48 ч.

После инкубирования чашки с посевами просматривают и отмечают рост характерных колоний.

На среде ПАЛ листерий через 24 часа инкубации образуют мелкие серовато-желтые колонии с черным ореолом диаметром от 1 до 2 мм. Посторонняя кокковая микрофлора образует выпуклые колонии лимонно-желтого цвета диаметром от 1 до 4 мм, окруженные слабым (или без него) покраснением питательной среды.

При появлении сплошного роста листерий проводят пересев бакте­риологической петлей из зон наибольшего почернения среды штриха­ми на поверхность двух чашек Петри с агаром ПАЛ для получения изо­лированных колоний.

При отсутствии роста характерных колоний листерий на агаре ПАЛ исследование прекращают и делают заключение об отсутствии Listeria monocytogenes в исследуемой пробе продукта.

УСЛОВИЯ И СРОКИ ХРАНЕНИЯ:

Срок годности питательной среды в прохладном, защищённом от све­та месте в герметично укупоренном флаконе - 6 месяцев.

Не вскрытый флакон с селективной добавкой хранится в рефрижера­торе при температуре до 8 О С в течение года.

Раствор селективной добавки хранится при 2 - 8 О С в течение 4 суток.

Чашки Петри с разлитой в них средой хранятся не более 22 суток в защищенном от света месте и при температуре не выше 8 О С.